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《基础分子生物学实验指导》_卢亚萍主编;沈文飚副主编_13741823_7040418590

【书名】:《基础分子生物学实验指导》
【作者】:卢亚萍主编;沈文飚副主编
【出版社】:北京:高等教育出版社
【时间】:2015
【页数】:143
【ISBN】:7040418590
【SS码】:13741823

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内容简介

第一章 基因组DNA操作技术

第一节 基因组DNA的提取

实验一 SDS法提取小麦叶片DNA

实验二 动物组织基因组DNA的提取

实验三 细菌基因组DNA的提取

第二节 DNA质量的检测

实验四 核酸的酶切及电泳

第三节 Southern杂交技术

实验五 小麦基因组DNA的Southern杂交

第二章 质粒操作技术

第一节 外源基因插入质粒及转化大肠杆菌

实验一 外源基因与质粒载体的连接

实验二 热击法转化质粒

第二节 质粒的提取及检测

实验三 碱裂解法提取大肠杆菌质粒

实验四 质粒的酶切鉴定

第三章 RNA操作技术

第一节 总RNA的提取及分析

实验一 用TRIZOL试剂提取小麦叶片总RNA

实验二 从冰冻血液中提取总RNA

实验三 总RNA的变性凝胶电泳

第二节 Northern杂交技术

实验四 小麦衰老相关蛋白基因的Northern杂交

第三节 cDNA文库构建及筛选

实验五 小麦cDNA文库的构建

第四章 PCR技术与应用

第一节 普通PCR

实验一 PCR检测重组质粒中的插入片段

实验二 随机引物扩增多态DNA(RAPD)

附 用16S rDNA方法鉴定细菌种属

第二节 反转录PCR

实验三 反转录PCR扩增小麦β-actin基因

第三节 定时荧光定量PCR

实验四 定时荧光定量PCR测定小麦中Cu/Zn-SOD基因含量

第五章 电子克隆

实验一 基于生物信息学克隆水稻过氧化氢酶基因

第六章 蛋白质分离与检测技术

第一节 SDS-PAGE电泳分离蛋白质

实验一 SDS-PAGE电泳检测蛋白质相对分子质量

附 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶的层析分离与电泳鉴定

第二节 Western杂交技术

实验二 小麦RuBisCO蛋白的Western杂交

第三节 等电聚焦电泳

实验三 小麦过氧化物酶同工酶的等电聚焦分析

第四节 蛋白质双向电泳

实验四 蛋白质双向电泳检测小麦叶片蛋白

第七章 外源基因的表达

第一节 外源基因在大肠杆菌中的表达

实验一 绿色荧光蛋白基因表达载体的构建

实验二 绿色荧光蛋白在大肠杆菌中的诱导表达

第二节 外源基因在枯草杆菌中的表达

实验三 枯草杆菌电击转化(高渗透法)

实验四 重组载体pHT43-lip在枯草杆菌中的分泌表达

第三节 外源基因在酵母中的分泌表达

实验五 绿色荧光蛋白重组表达载体pPIC9K-GFP的构建

实验六 绿色荧光蛋白在毕赤酵母中的诱导表达

主要参考文献

附录

附录一 常用试剂及缓冲液

附录二 氨基酸及遗传密码

附录三 常用的相对分子质量标记

附录四 分子生物学有关网络资源

附录五 分子实验常用仪器设备


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