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《现代分子生物学模块实验指南 第2版》_李玉花,徐启江主编_14371770_9787040470574

【书名】:《现代分子生物学模块实验指南 第2版》
【作者】:李玉花,徐启江主编
【出版社】:北京:高等教育出版社
【时间】:2017
【页数】:411
【ISBN】:9787040470574
【SS码】:14371770

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内容简介

模块一 目的基因的克隆及序列分析

1-1 RNA的提取及检测

1-2 RT-PCR方法扩增目的基因

1-3 cDNA末端快速扩增法(RACE)合成目的基因

1-4目的基因的克隆

1-5目的基因的序列测定及初步分析

1-6 cDNA文库的构建及目的基因的筛选

1-7 mRNA差别显示克隆差异表达基因

1-8电子克隆法获得目的基因

1-9化学合成法获得目的基因

模块二 核酸分子杂交

2-1 Southern杂交

2-2 Northern杂交

2-3原位杂交

2-4原位RT-PCR

模块三 大规模基因差异表达分析

3-1基因芯片分析

3-2基于第二代高通量测序技术的转录组测序分析

3-3差异表达基因功能富集分析

3-4实时荧光定量PCR检测基因表达

模块四 单核苷酸多态性的检测

4-1衍生酶切扩增多态性序列法

4-2 Taqman荧光探针法

4-3高分辫率熔解曲线法

4-4定向诱导基因组局部突变技术

模块五 目的基因的遗传转化

5-1 PCR法克隆目的基因全长

5-2 Gateway技术构建表达载体

5-3农杆菌真空渗入法遗传转化

5-4水稻愈伤组织的遗传转化

5-5 RNAi发夹式载体构建及转化

5-6 CRISPR/Cas9技术构建表达载体

5-7大规模突变体库的构建

模块六 蛋白质样品的制备、分离与鉴定

6-1蛋白质样品的制备

6-2蛋白质的定量

6-3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质

6-4双向电泳分离蛋白质

6-5荧光标记差异分析凝胶电泳法分析差异表达蛋白质

6-6蛋白质样品的质谱鉴定

模块七 目的蛋白质表达、纯化与检测

7-1目的基因原核表达质粒的构建

7-2谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白的表达与纯化

7-3组氨酸标签融合蛋白的表达与纯化

7-4麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的表达与纯化

7-5免疫印迹检测目的蛋白质的表达

模块八 蛋白质相互作用的研究

8-1经典酵母双杂交

8-2 Pull-down分析蛋白质相互作用

8-3蛋白质亚细胞共定位

8-4免疫共沉淀

8-5 T7噬菌体展示筛选技术

8-6细胞质酵母双杂交系统

模块九 激光扫描共聚焦显微镜的应用

9-1激光扫描共聚焦显微镜的基本使用

9-2花粉管内钙离子梯度分布的观察

9-3动物细胞微丝微管细胞核共定位观察

9-4激光扫描共聚焦显微镜检测荧光蛋白

模块十 生物信息学软件与数据库应用

10-1常用分子生物学数据库检索

10-2常用分子生物学软件使用

10-3蛋白质结构及其相互作用预测

附录


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