第1章 聚丙烯酰胺凝胶电泳导论

引言

聚丙烯酰胺凝胶的性质

化学结构

聚合催化剂

有效孔径

实验方法

柱胶和板胶

解离或非解离缓冲系统

连续或不连续（多相）缓冲系统

pH选择

聚合催化剂的选择

凝胶浓度的选择

分子量测定

仪器

成胶装置和贮液槽

电泳所需要的其它装置

聚丙烯酰胺凝胶的制备和电泳

试剂

贮备液

凝胶混合液的制备

柱胶的制备

板胶的制备

样品制备

加样和电泳

电泳后的凝胶分析

凝胶的取出

蛋白质的染色及定量

放射性蛋白质的检定

糖蛋白及磷蛋白的测定

应用免疫学方法检测蛋白质

酶的检测

分离蛋白质的回收

蛋白质区带的定位

蛋白质的洗脱

基本技术的改进

寡肽的分子量分析

特殊蛋白质的分离

组蛋白

浓度梯度凝胶

大批量凝胶

微型柱胶和微型板胶

琼脂糖-丙烯酰胺混合凝胶

均一性和同一性

矫作物及故障

综合性参考文献

第2章 “定量”和制备性的聚丙烯酰胺凝胶电泳

引言

定量PAGE电泳仪概述

凝胶的选择

缓冲系统的选择

不连续的和连续的区带电泳

可供选择的不连续缓冲系统：Jovin输出

定量PAGE方法

策略

最适pH

堆积界限的选择

对蛋白质稳定和分离最佳条件的选择

最适孔径：Ferguson曲线图

同一性试验

分子大小和电荷异构

物理特性

最适分离孔径

制备性PAGE

凝胶切片的提取

连续区带洗脱

第3章 等速凝胶电泳

引言

操作程序

稳态堆积条件的最佳化

堆积区内的分离试验

凝胶切片提取法进行制备性等速电泳

用连续区带洗脱法进行制备性等速电泳

连续区带洗脱法进行制备性稳态堆积

第4章 分析和制备性凝胶聚焦电泳

应用凝胶聚焦电泳的时机

仪器

柱胶与水平板胶装置

电压控制装置

梯度监测装置

凝胶

聚丙烯酰胺凝胶

Sephadcx凝胶

琼脂糖凝胶

pH梯度的形成

“Ampholine”与缓冲液

两性或非两性载体组分

平坦的和陡峭的pH梯度

pH梯度的直线性

高离子强度下电聚焦

去污剂存在下的聚焦电泳

阳极和阴极电解液的选择

聚焦电泳的动力学

pH梯度

蛋白质

导电性

分析性凝胶聚焦电泳程序

制备性凝胶聚焦电泳

仪器

程序

第5章 双向凝胶电泳

导言

仪器

第一向凝胶

第二向凝胶

双向凝胶电泳的一般技术

溶液和仪器

样品的制备

第一向凝胶的制备

平衡第一向凝胶以便进行第二向分离

第二向凝胶的制备

多肽分布的分析

双向凝胶电泳的比较分析

根据等电点及分子量进行蛋白质双向分离

第一向分离

第二向分离

基本技术的改进

影响分离的因素

膜蛋白分离的改进

特殊类型蛋白质的分离

核糖体蛋白

组蛋白

核蛋白

第6章 蛋白质部分水解后的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳肽图

导言

仪器

方法学

实验步骤

基本技术的改进

资料的解释

第7章 免疫电泳

引言

抗原和抗体的制备

抗原

抗体的产生

抗血清商品

抗体活性分析

IgG抗体的纯化

简易免疫电泳

仪器

试剂

方法

放射免疫电泳

酶检测法

免疫电泳法的其它改进

对流电泳

“火箭”免疫电泳

双向免疫电泳（交叉免疫电泳）

故障

综合性参考文献

附录Ⅰ 多肽检测方法文献目录

多肽检测的一般方法

染色法

荧光染色法

直接检测法

以放射性同位素为基础的检测方法

特殊多肽的检测方法

糖蛋白

磷蛋白

核蛋白

具有可以进行反应的巯基蛋白质

含镉蛋白

胶原（蛋白）及原胶原蛋白

免疫方法

酶检测法

附录Ⅱ 同位素标记蛋白质用试剂

一览表

试剂

乙酸酐(3H或14C)

Bolton和Hunter试剂(125I)

溴乙酸(14C)

氯乙酸(14C)

对-氯汞苯磺酸(203Hg)

对-氯汞苯甲酸(20？Hg)

丹磺酰氯(5-二甲胺-1-萘磺酰氯) (3H或14C)

DHP(二异丙基氟磷酸)（3H）

乙基亚胺乙酯(14C)

N-乙基马来酰亚胺(？4C)

1-氟-2,4-二硝基苯(3H或14C)

甲醛(14C)

碘(12？I)

碘乙酰胺(14C)

碘乙酸(3H或14C)

乙磺酰乙酰亚胺(14C)

马来酸酐(14C)

甲基3,5-二碘羟基苯亚胺(12？I)

异硫氰酸苯酯(24C或？?S)

氢硼化钾（3H）

氢硼化钠（3H）

琥珀酸酐(14C)

N-琥珀酰亚胺丙酸（3H）

附录Ⅲ 选择蛋白质标志物的分子量及等电点

附录Ⅳ 供应电泳专用附件的厂商

参考文献