目录

引言和背景

第一部分　分子生物学

实验一

微量移液器使用指南

实验二

质粒DNA模板的制备

（2）PCR扩增质粒DNA的LTB基因

（1）测定质粒DNA浓度

实验三

实验四

（1）琼脂糖凝胶电泳

（2）PCR产物回收

实验五

（1）限制性内切酶酶切LTB插入基因和载体

（2）平板制备

（2）酶切后插入基因片段和载体的回收

（1）琼脂糖凝胶电泳法纯化酶切后的插入基因片段和载体

实验六

实验七

（1）DNA浓度测定

（2）插入基因与载体的连接

实验八

重组体转化宿主细胞

（3）接种培养物／PCR反应／分离质粒

（2）用可能的重组子划线平板

（1）挑取菌落，PCR检测插入片段

实验九

实验十

（1）琼脂糖凝胶电泳检测插入基因

（2）用质粒少量制备试剂盒纯化pET28LTB

实验十一

（1）DNA浓度检测

（2）乙醇沉淀质粒DNA

（3）测序反应

（2）测序凝胶示范

实验十二

（1）纯化延伸反应产物

实验十三

（1）分析序列数据

（2）验证插入序列

实验十四

（1）基因表达

（2）表达宿主的转化

诱导LTB基因表达：测定最大表达的时间

实验十五

第二部分　蛋白质化学

实验十六

（1）SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析诱导时间过程

（2）用Western blot将蛋白质转移至膜上

实验十七

Western Blot的显像

实验十八

大规模培养物的制备

亲和层析法分离LTB

实验十九

实验二十

（1）柱层析分段物的SDS-PAGE鉴定

（2）免疫印迹检验LTB的存在

实验二十一

蛋白质浓缩和结晶

实验二十二

准备ELISA微量滴定板来分析系列神经苷脂配体

实验二十三

用ELISA分析系列神经节苷脂配体

实验二十四

蛋白质结构测定：X射线衍射技术

实验二十五

用X射线衍射分析蛋白质晶体的特征（可任选）

实验二十六

引物设计

索引